王继强：大肠杆菌的检测方法
史剑的回答：
原发布者:醉清风201208 饮用水中大肠杆菌及检测方法一、乳糖发酵实验（初发酵实验）溶液与试剂：乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨20g，猪胆盐5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。（乳糖胆盐培养基取30g，溶于1000mL纯水中即可）操作步骤1：将配制好的培养液，分装于每管10mL，共装9个试管，并各放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。2：水样稀释（1）无菌操作取水样1mL放于含9mL的灭菌生理盐水中，置于容量瓶中，震荡摇匀为1:10的稀释液。取上述稀释液1mL，注入9mL灭菌生理盐水，震荡摇匀，为1:100的稀释液。（2）取水样，1:10稀释液，1：100稀释液各1mL接种到乳糖胆盐发酵管中。（根据检样的污染程度可以适当调整稀释的比例）每一稀释度接种三管。3：将试管连同试管架放入培养箱中37℃左右培养24h。产酸溶液会由紫色变为黄色，产气发酵管中会有气泡。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则报告大肠杆菌群阴性，如有产气管，就需要进行分离培养，即进行伊红美蓝培养基鉴别实验。二、伊红美蓝培养基鉴别实验（接种实验）伊红美蓝琼脂（EMB)成分：蛋白胨10g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红溶液20mL。0.65%美蓝溶液10mL，蒸馏水1000L，pH7.1.制法：将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min，备用。临用时加入乳糖，并加热融化琼脂，冷至50~55℃，加入伊红美蓝溶液，摇匀，倾注平板。操作步骤1称量：准确称取各成分。2溶化：加热熔化，定容。3调
梁荣华的回答：
原发布者:醉清风201208 饮用水中大肠杆菌及检测方法一、乳糖发酵实验（初发酵实验）溶液与试剂：乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨20g，猪胆盐5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。（乳糖胆盐培养基取30g，溶于1000mL纯水中即可）操作步骤1：将配制好的培养液，分装于每管10mL，共装9个试管，并各放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。2：水样稀释（1）无菌操作取水样1mL放于含9mL的灭菌生理盐水中，置于容量瓶中，震荡摇匀为1:10的稀释液。取上述稀释液1mL，注入9mL灭菌生理盐水，震荡摇匀，为1:100的稀释液。（2）取水样，1:10稀释液，1：100稀释液各1mL接种到乳糖胆盐发酵管中。（根据检样的污染程度可以适当调整稀释的比例）每一稀释度接种三管。3：将试管连同试管架放入培养箱中37℃左右培养24h。产酸溶液会由紫色变为黄色，产气发酵管中会有气泡。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则报告大肠杆菌群阴性，如有产气管，就需要进行分离培养，即进行伊红美蓝培养基鉴别实验。二、伊红美蓝培养基鉴别实验（接种实验）伊红美蓝琼脂（EMB)成分：蛋白胨10g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红溶液20mL。0.65%美蓝溶液10mL，蒸馏水1000L，pH7.1.制法：将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min，备用。临用时加入乳糖，并加热融化琼脂，冷至50~55℃，加入伊红美蓝溶液，摇匀，倾注平板。操作步骤1称量：准确称取各成分。2溶化：加热熔化，定容。3调
思想在裸奔的回答：
大肠杆菌的检验方法（sn方法）致泻性大肠杆菌的检验（gb方法简介）大肠杆菌o等效采用美国fda的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。本方法采用
陈梓嘉的回答：
多管发酵法。
多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法，这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h，而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶，从而释放出荧光产物，进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。
在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵，分离培养试验，利用伊红美蓝培养皿分离，接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵，最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高，成本低，但是检测时间较长，容易受其他条件干扰，进而影响到测定结果的精确度。
曹晓雯的回答：
一、细菌的分离鉴定
1、标本：肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。
2、分离培养与鉴定：粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。其他标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性培养基。
37℃孵育18～24小时后，观察菌落并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。必要时检定肠霉毒素。
泌尿系统除确定大肠杆菌外，还应计数，每毫升尿含菌量≥100，000时，才有诊断价值。
二、卫生细菌学检查
大肠杆菌不断随粪便排出体外，污染周围环境和水源、食品等。取样检查时，样品中大肠杆菌越多，表示样品被粪便污染越严重，也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。故应对饮水、食品、饮料进行卫生细菌学检查。
1、细菌总数：检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。中国规定的卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。
2、大肠菌数指数：指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。中国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。
三、全自动微生物定量分析仪（TEMPO）检测
全自动微生物定量分析（TEMPO）仪的大肠杆菌群计数检测有TC和CC两种方法。TEMPO TC的开发是为了获得NF ISO4832标准相当性能水平。
TEMPO CC法是TEMPO仪器上根据BAM方法专门用于24h计数食品中大肠杆菌群的方法。该法是为了获得和AOAC官方方法966.24及美国公共健康联合会检测乳制品检测方发（SMEDP）一致的效果。TEMPO系统根据阳性空的大小和数目来推算出原始样本中大肠杆菌群数目。