邹正的回答：凝胶色谱法分离原理： 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。具有多孔的凝胶就是分子筛。 各种分子筛的孔隙大小分布有一定范围，有最大极限和最小极限。分子直径比凝胶最大孔隙直径大的，就会全部被排阻在凝胶颗粒之外，这种情况叫全排阻。两种全排阻的分子即使大小不同，也不能有分离效果。直径比凝胶最小孔直径小的分子能进入凝胶的全部孔隙。如果两种分子都能全部进入凝胶孔隙，即使它们的大小有差别，也不会有好的分离效果。因此，一定的分子筛有它一定的使用范围。 在凝胶色谱中会有三种情况，一是分子很小，能进入分子筛全部的内孔隙；二是分子很大，完全不能进入凝胶的任何内孔隙；三是分子大小适中，能进入凝胶的内孔隙中孔径大小相应的部分。大、中、小三类分子彼此间较易分开，但每种凝胶分离范围之外的分子，在不改变凝胶种类的情况下是很难分离的。对于分子大小不同，但同属于凝胶分离范围内各种分子，在凝胶床中的分布情况是不同的：分子较大的只能进入孔径较大的那一部分凝胶孔隙内，而分子较小的可进入较多的凝胶颗粒内，这样分子较大的在凝胶床内移动距离较短，分子较小的移动距离较长。于是分子较大的先通过凝胶床而分子较小的后通过凝胶床，这样就利用分子筛可将分子量不同的物质分离。另外，凝胶本身具有三维网状结构，大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大，小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时，按照分子量大小排队，凝胶表现分子筛效应。 ——————————————————————————————————— 交联葡聚糖凝胶（Sephadex）： ⑴SephadexG交联葡聚糖的商品名为Sephndex，不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克，同样G-200克每克千胶吸水20克。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。因此，“G”反映凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。 ⑵SephadexLH-20，是SephadexG-25的羧丙基衍生物，能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。 交联葡聚糖凝胶是将纯化后的线性葡聚糖（a-1，b-吡喃型葡聚糖）与环氧氯丙烷反应，再导入丙三醇侧链而在葡聚糖链间形成交联链，再将所得的凝胶制成直径不同的球形即可。所得三维实体在水中能溶胀而不能溶解。交联度越高，凝胶孔径越小。 各种葡聚糖凝胶的分离范围与用途： SephadexG-10葡聚糖凝胶G-10分离范围<700适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-15葡聚糖凝胶G-15分离范围<1500适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-15葡聚糖凝胶G-15分离范围<1500适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 Sepharose6B琼脂糖凝胶6B分离范围：1000-5000，适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 ConA-SepharoseConA琼脂糖凝胶分离范围：1000-5000，适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-25Medium葡聚糖凝胶G-25中分离范围1000-5000适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-25Medium葡聚糖凝胶G-25中分离范围1000-5000适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-25Fine葡聚糖凝胶G-25细分离范围1000-5000适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-25Fine葡聚糖凝胶G-25细分离范围1000-5000适用于脱盐、肽与其它小分子的分离 SephadexG-50Medium葡聚糖凝胶G-50中分离范围1500-30000SephadexG-50Medium葡聚糖凝胶G-50中分离范围1500-30000SephadexG-75葡聚糖凝胶G-75分离范围3000-80000 SephadexG-75葡聚糖凝胶G-75分离范围3000-80000 DEAESepharoseFFDEAE琼脂糖凝胶FF分离范围：3000-80,000SephadexG-100葡聚糖凝胶G-100分离范围4000-150000 SephadexG-100葡聚糖凝胶G-100分离范围4000-150000 SephadexG-150葡聚糖凝胶G-150分离范围5000-300000 DEAESepharoseCI-6B琼脂糖凝胶CI-6B分离范围：5000-300,000SephadexG-150葡聚糖凝胶G-150分离范围5000-300000 SephadexG-200葡聚糖凝胶G-200分离范围5000-600000 SephadexG-200葡聚糖凝胶G-200分离范围5000-600000 SephadexG-200葡聚糖凝胶G-200分离范围5000-600000 DEAESephadexA-25DEAE葡聚糖凝胶A-25颗粒大小：40-120μm分离大小：小蛋白及巨大分子 DEAESephadexA-25DEAE葡聚糖凝胶A-25颗粒大小：40-120μm分离大小：小蛋白及巨大分子 DEAESephadesA-50DEAEDEAE葡聚糖凝胶A-50颗粒大小：40-120μm，分离范围：小蛋白及巨大分子 具体，请参考： http://baike.baidu.com/view/1472951.htm?fr=ala0_1_1 http://baike.baidu.com/view/1410242.htm?fr=ala0_1 ——————————————————————————————————— 短小精悍版： 一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出。 |
