马佳倩的回答：我们固定脑组织做免疫组化染色就是这么做的。但是在配置多聚甲醛的时候，由于多聚甲醛很难融解，以般需碱性条件，并附以温热融解。如果直接配成PB＋多聚甲醛，比较难融解。我们是先用蒸馏水配置500ml8％多聚甲醛，融解后加入500ml 0.2 M PB。 离离草的回答：4 ％多聚甲醛（ pfa ）配制 称取 40gpfa 溶于装有 500mldepc 水的玻璃容器（烧杯或烧瓶）中，持续加热 磁力搅拌至 60 － 65 ℃ , 使成乳白色悬液。用 1.0mmol/l 的 naoh 调 ph 至 7.0 使呈清亮状 （滴加），再加入约 500ml 2× pbs ，充分混匀（在冰浴或冷水浴中）。可再检测一下 ph ， 过滤后定容至 1000ml ，室温或 4 ℃ （保存备用）。 注意： 1. 配制时应在通风条件下操作，并避免接触皮肤及吸入（戴口罩及手套），因 pfa 有较强的毒性，对粘膜及皮肤有刺激作用。 2. 加热时，温度不可过 高，常为 60 － 65 ℃ 。 否则 pfa 降解失效，配制好的 pfa 虽可有效一点时间，但过久的液体，固定效果下降， 应用前新鲜配制。 除了用 depc 水配制 pfa 外，也可以用灭菌蒸馏水或经 depc 处理的 0.01 － 0.1 ％ /l 的 pbs 配制，方法及主要事项同上。 |
